摘要：現代研究征明蜂膠具有顯著的抗腫瘤活性，國內外研究人員對其化學成分進行研究，發現蜂膠中以咖啡酸苯乙酯、阿替匹林、白楊素等為代表的幾大類成分均具有顯著的抗腫瘤作用。本文綜述了以上各類成分的抗腫瘤作用及其作用機制的研究進展。

關鍵詞：蜂膠；抗腫瘤；活性成分

蜂膠作為一種天然藥物，已證明其具有抗病原微生物、抗炎、免疫調節和抗腫瘤作用，特別是其抗腫瘤作用引起人們廣泛的關注。研究表明蜂膠對人鼻咽癌、子宮頸癌、乳腺癌、腎癌、大腸癌等人癌細胞株均具有強烈的毒殺作用。已有多種抑制腫瘤細胞生長的有效成分已被鑒定出來，主要是咖啡酸及肉桂酸類的衍生物和黃酮類化合物等。本文就蜂膠的抗腫瘤成分及作用機理研究進展進行簡要論述。

1 咖啡酸類衍生物

CAPE(咖啡酸苯乙酪)是蜂膠中一種較早被確認的抗腫瘤成分。近年國外研究報道，作為蜂膠抗腫瘤作用的主要活性成分，對人白血病細胞和多種實體瘤細胞具有明顯的抑制增殖和誘導凋亡作用，而且能顯著抑制NIH/3T3細胞被肉瘤相關病毒MuSV-124的惡性傳染。CAPE能抑制兩種腫瘤細胞系的生長，調節兩種細胞系中與腫瘤相關抗體的表達。CAPE可選擇性誘導癌細胞株的DNA斷裂。如鼠高肝轉移性結腸癌26-Ij細胞株、鼠高肝轉移性惡性黑色素瘤BL6細胞株、鼠肺癌LLC細胞株、人纖維肉瘤HT-1080細胞株、人肺腺癌A549細胞株和人宮頸癌HeLa細胞株的生長均有抑制作用，但不同的細胞株對，CAPE的敏感性不同。結腸癌26-L5細胞的半數致死濃度(EC50))為0.15μmol·L-1，而HeLa細胞為10.7 μmol·L-1。CAPE還可減少由致癌物氧化偶氮甲烷導致的小鼠結腸畸形腺窩灶(ACF)的形成和腫瘤的產生，而目前認為結腸黏膜ACF的形成是導致大腸癌發生的關鍵階段。更值得研究人員興奮的是CAPE及其衍生物對不同細胞具有選擇性的毒性作用，對舌鱗癌、頸部牙齦轉移癌等腫瘤細胞生長具有明顯的抑制作用，但對黏膜成纖維細胞等正常細胞卻沒有作用。

CAPE的抗腫瘤作用部分機理已經被闡明。Hye等認為具有潛在的抑制腫瘤入侵及轉移作用，這種作用是由細胞基質金屬蛋白酶的調節決定的。細胞基質金屬蛋白酶是一種Zn-依賴的蛋白水解酶，在細胞外基質的分裂增殖過程中起著關鍵作用。用不同劑量CAPE處理人成纖維肉瘤發現CAPE能夠顯著下調基因的表達水平。另外，也觀察到CAPE能抑制MMP-2活化的全過程，如人侵、活動、細胞遷移、聚集，為CAPE抗腫瘤提供了有力證據。

CAPE抗腫瘤作用可能與CAPE能夠修復細胞間縫隙連接有關。用CAPE處理縫隙連接缺失的WB-ras2細胞后，可引起細胞生長受抑，細胞縫隙連接明顯恢復，其細胞連接相關蛋白連接素-43的表達上調并定位于細胞膜。

CAPE能夠抑制腫瘤基因的表達。CAPE對TPA引起的腫瘤增長和5-經甲基-2’-脫氧尿嘧啶形成有潛在的抑制活性，在Hela細胞培養基中1.25、2.5、5、10、20 mmol·L-1的CAPE對DNA合成抑制率分別為32％、44％、朗％、79％、95％；對RNA合成抑制率分別為39％、43％、58％、64％、75％，對蛋白質合成抑制率分別為29％、30％、37％、32％、47％。CAPE處理兩個p53腫瘤突變異種細胞系NCI-H358和SKOV-3及缺乏型p53細胞引起cas-pase-3和DNA斷裂。

CAPE引起腫瘤細胞凋亡作用還可由p38絲裂原活化蛋白激酶通路介導。CAPE(50 μmol·L-1)處理C6膠質瘤細胞，能夠誘導細胞色素C從線粒體釋放到細胞漿，激活CPP32，也上調了p53、Bax和Bak基因的表達。活化了細胞外的ERKs/p38 MAPK通路，p38激酶和p53形成一個復合體，誘導p53磷酸化，使得C6膠質瘤細胞凋亡。

另外，從荷蘭蜂膠中提取得到CAPE類似物咖啡酸苯乙酪、咖啡酸苯丙酯、咖啡酸肉桂醇酯。3種成分對鼠肝轉移結腸癌26-L5細胞都顯示了抑制作用，EC50分別為0.288、1.76和0.114 μmol·L-1。

2 肉桂酸類衍生物

近年來研究人員發現，Artepillin C (阿替匹林)及其結構衍生物是蜂膠中一類獨特的對腫瘤細胞具有細胞毒性作用的活性成分。實驗中發現，在體外腫瘤細胞抑制試驗中，100 μ ml-1 Anepillin C發現具有明顯的細胞毒作用，能夠強烈抑制人肺癌HLC細胞(腺癌)、腸癌HGC細胞、鼠肝癌HTSA細胞、鼠惡性腫瘤Colon 26和B-16細胞、喉癌KB細胞、和鼠黑素瘤上皮細胞Clone M-3的DNA合成，并能引起HLC、HGC、Colon 26、人白血病細胞的細胞凋亡。在裸鼠移植HLC、HGC、Colon 26、HTSA、PLC/PRF/5、黑色素瘤細胞動物實驗中，每只裸鼠瘤內注射Artepillin C 500 μg，即檢測到細胞凋亡、有絲分裂中止、腫瘤細胞核溶解、腫瘤細胞死亡，最后癌病變組織被膠原限制，腫瘤細胞入侵浸潤也被阻止，而人正常細胞的生長不受影響。低劑量Artepillin C(500 μg)還可以預防鐵-氮基三醋酸酪(FeNTA)誘發的小鼠支氣管和細支氣管腺瘤惡性轉化，阻止肺癌的發展。

Artepllin C 對于不同系列的人白血病細胞如T-淋巴細胞性白血病細胞、β-淋巴細胞性白血病細胞、髓性白血病細胞、非淋巴、非髓性白血病顯示了明顯的細胞毒作用，100 μml·L-1“處理24h，能顯著誘導這些白血病腫瘤細胞凋亡，其中對T-淋巴細胞性白血病細胞作用最強。所有細胞都觀察到了凋亡小體和DNA碎片。所有白血病細胞的DNA合成都受到抑制，同時顯微鏡觀察到細胞被瓦解。白血病細胞的凋亡可能與Fas抗原的表達增強和喪失線粒體膜電位有關。試驗證明 Artepllin C有抗白血病作用，但對正常的淋巴細胞僅僅是有限的抑制作用。

氧化偶氮甲烷處理DDY小鼠造成結腸癌模型，灌胃80和160 mgkg-1 蜂膠或10 mgkg-1Artepillin C (相當160 mg蜂膠)能夠顯著將結腸畸形腺窩灶的發生率降低39.2％，43.7％和 43.4％。Shimizu 等將 Artepllin C 加到人結腸癌腺細胞WiDr中，發現能夠誘導細胞周期G(O)肥(1)期，并抑制腫瘤細胞生長。通過增強腫瘤關鍵蛋白Cip1/p21的活性，刺激Cip1/p21的表達來影響腫瘤細胞周期。

Akao 等報道了另外兩種肉桂酸的衍生物 drupanin、Baccharin 對結腸癌細胞、胃癌細胞、白血病細胞的抑制活性。濃度為150 μmol·L-1時，它們對以上所有細胞均有顯著抑制作用，抑制效果為 artepillin C＞Baccharin＞drupanin。從試驗結果推測出該類化合物苯環上3位異戊二烯基團有助于抗腫瘤活性。但 Drupanin 似乎體現了比artepillin C 更小的副作用，對于Con-A誘導的人正常血中淋巴細胞的細胞毒作用，Drupanin 要弱于Artepillin C。

3 黃酮類化合物

蜂膠中對腫瘤起作用的黃酮類化合物主要是黃酮及黃酮醇類、二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物，這些物質對致癌物有抑制作用。試驗中用抗微核實驗模型對一些黃酮和黃酮醇衍生物進行篩選，發現大多數黃酮醇有抗苯并花的作用，其中高良姜黃素活性最強。蜂膠中的蘆丁、桑黃素、槲皮素均能抑制苯并芘對小鼠皮膚的致癌作用；芹黃素、山奈酚、槲皮素對黃曲霉素B1與DNA加合物的形成有抑制作用，并能明顯抑制對二甲基苯并蒽誘導的小鼠皮膚癌作用；槲皮素對TPA、3-甲基膽恿、N-甲基-N-亞硝基脂等引起的皮膚癌也有抑制作用。

Kyung 等的實驗發現蜂膠中的Chrysin(白楊素)能夠誘導人白血病細胞U937細胞凋亡，并闡明了機理。在U937細胞中，如使用PI3K抑制劑，抑制了Akt的磷酸化，就會發現增強了Chrysin的誘導凋亡作用；而如果Akt的過度表達，則會抑制Chrysin誘導腫瘤細胞凋亡。提示了Akt信號途徑在chrysin誘導人白血病細胞凋亡過程中起著重要作用，即有可能是建立了ChrYsin和P13K從kt-相關的通路之間的連接。這對惡性血液疾病提供了一個新的治療策略。還有研究表明Chrysin能夠顯著下調NF-IL6，抑制了NF-IL6與DNA的結合，抑制和阻斷癌基因表達。Chen等從臺灣蜂膠中分離到三種新異戊二烯基黃酮，Propolin A、B、C。Propolin A和B對3個癌細胞系的都顯示了細胞毒性，DNA含量和DNA片段分析，Propolin A 有效地誘導癌細胞凋亡，并表現出強力的抗大部分自由基的消除作用。Propolin C對于人黑色素瘤細胞也觀察到細胞毒作用(IC50為8.5 μmol·L-1)，能夠劑量或時間依賴性地降低幾種能夠引起人黑色素瘤細胞凋亡的蛋白的水平如Procaspase-8，Bid蛋白、procaspase-3，而且能使細胞色素C從線粒體釋放到細胞漿中，提示了Propolin C的細胞毒作用是由線粒體介導。

4 雙萜烯酸類化合物

試驗用高效液相色譜從巴西蜂膠甲醇提取液中分離出一種抗腫瘤物質，定性為新clerodane二萜烯(PMS-1)，分子式C20H32O3；(分子量320)。該化合物能夠抑制DNA的合成減少皮膚癌的發生率，并且通過降低DNA的合成抑制腫瘤的生長。日本研究人員根據對人肝細胞癌細胞毒性的檢驗，從巴西蜂膠甲醇提取液中分離出兩個clerodane雙萜異構體，分別為15-氧代-3，13Z-kolavadien-17-含氧酸和15-氧代-3z-13E-kolavadien-17-含氧酸。

5 苯并吡喃類

Luo 從巴西蜂膠中分離出活性成分苯并-Y-毗喃衍生物PM-3，能夠抑制人胸腺癌MCF-7細胞生長。在G1階段用PM-3處理MCF-7細胞，結果導致細胞周期蛋白D1和E蛋白水平的降低，PM-3也抑制了轉錄水平上的細胞周期蛋白D1的表達。從巴西蜂膠分離出（Z）-2，2-甲基-8-(3-甲基-2-丁基)-苯并吡喃-6-丙烯酸(A)和(E)-2，2-甲基-8-(3-甲基-2-丁基)-苯并吡喃-6-丙烯酸(B)。在紫外線(365 nm)照射下B迅速變成A，也觀察到相反的反應。反應從A或B開始，A和B的比率到達2.3，達到一個光穩定態。在抗人肺癌細胞HLC-20方面，A比B的細胞毒性強7倍。

蜂膠的抗腫瘤作用早已為人所知，但是一些研究報道值得注意。烏拉圭蜂膠的乙醇提取物是乳腺癌的一種抑制劑，而巴西蜂膠的水提取物和乙醇提取物對乳腺癌影響不大。說明蜂膠的來源和制備對于抑制腫瘤非常重要。還有報道，在成年大鼠抗艾氏癌實驗中，蜂膠醇提液與博來霉素合用時的大鼠存活率要低于二者單獨使用時的存活率。

近十年來，蜂膠以及其中的抗腫瘤活性成分的研究取得了巨大進展。不少效果良好的抗腫瘤成分成分結構新穎、有藥用前途的先導化合物。我國是世界上養蜂和蜂產品生產大國，蜂膠資源豐富，隨著對蜂膠抗腫瘤作用及其作用機理的不斷深入研究，蜂膠在征服癌癥中必將發揮應有的作用。

引自《中國蜂業》2007（50）