摘要：瓦螨（V. arroa)為分布于亞洲東方蜜蜂及全世界西方蜜蜂的自然外寄生螨類，嚴(yán)重危害世界養(yǎng)蜂業(yè)。本文介紹了瓦螨的分類地位，形態(tài)學(xué)及遺傳學(xué)的分類方法和結(jié)果。記錄了我國(guó)瓦螨分類分布的研究進(jìn)展。并討論了瓦螨分類學(xué)研究的意義，存在的問題以及對(duì)將來研究工作的展望。

關(guān)鍵詞：瓦螨；分類；基因型；形態(tài)學(xué)

1 簡(jiǎn)介

瓦螨屬于蜜蜂的外寄生螨類。根據(jù)我國(guó)的學(xué)者采用Walter(1999)分類系統(tǒng)，其分類地位如下：節(jié)肢動(dòng)物門，蛛型綱，蜱螨亞綱，寄螨總目，中氣門目，皮刺螨總科，瓦螨科(V arroidae)，瓦螨屬(V arroa)。其中有四個(gè)種類，它們分別是：雅氏瓦螨(V. jacobsoni, Oudemans 1904)；狄斯瓦螨(V. destructor, Andersonand Trueman 2000)；恩氏瓦螨(V. underwoodi, Delfinado-Baker and Aggarwal l987)；林氏瓦螨（V.rindereri, De Guzman and Delfinado Delfinado-Baker 1996)。

在這4個(gè)種類中，早先雅氏瓦滿與狄斯瓦螨被統(tǒng)稱為雅氏瓦螨。它開始寄生于全亞洲的東方蜜蜂和印度尼西亞的蘇拉威西蜂上。西方蜜蜂被引進(jìn)亞洲后，大蜂螨開始寄生于西方蜜蜂，其遷移過程的細(xì)節(jié)仍不能確定，在我國(guó)，1957年發(fā)現(xiàn)大蜂螨對(duì)江浙一帶的西方蜜蜂造成危害，至今仍是我國(guó)最重要的蜜蜂寄生蟲害。大蜂螨幾乎遍布世界各地，只有在澳大利亞和部分非洲地區(qū)仍末發(fā)現(xiàn)。

許多研究表明，來自不同種群的雌性大蜂螨除了個(gè)體大小外，有顯著一致的表型特征。有人認(rèn)為，即使來自不同種群的瓦螨在身體特征上十分相似，它們對(duì)于西方蜜蜂的危害能力卻并不相同。最大的差異來自起源于爪哇的雅氏瓦螨，也即是最初發(fā)現(xiàn)這一物種時(shí)的類型。這種螨完全不具備在西方蜜蜂群中繁殖的能力，研究表明其線粒體DNA細(xì)胞色素氧化酶基因序列與歐洲西方蜜蜂寄生的同表型瓦螨有6.7％差異。根據(jù)澳大利亞D.Anderson的研究以及其他一些關(guān)于雅氏瓦螨種群間差異的報(bào)道，可以推測(cè)出雅氏瓦螨可能不僅只有一個(gè)種類。

隨著研究的深入，到2000年，澳大利亞D.Anderson正式提出，危害全世界西方蜜蜂的瓦螨應(yīng)屬于新命名的狄斯瓦螨(Varroa destructor)的兩個(gè)基因型：朝鮮基因型和日本/泰國(guó)基因型，其在東方蜜蜂的雄蜂房以及西方蜜蜂的雄蜂房和工蜂房都可以正常繁殖。而狄斯瓦螨的其它基因型和雅氏瓦螨的所有基因型都只能在東方蜜蜂的雄蜂房中繁殖，不能在西方蜜蜂幼蜂房和東方蜜蜂的工蜂房?jī)?nèi)繁殖。D.Anderson博士還發(fā)現(xiàn)無論狄斯瓦螨還是雅氏瓦螨的各基因型之間都保持著生殖隔離。狄斯瓦螨的界定是蜜蜂寄生瓦螨研究的里程碑。此前所有科學(xué)著作及教科書上都把大蜂螨當(dāng)做了單一的雅氏瓦螨，給以后的研究與防治工作帶來了許多誤區(qū)。而狄斯瓦螨的發(fā)現(xiàn)使蜜蜂寄生螨類的研究步人了正軌，并帶來了一系列的突破性進(jìn)展。

2 線粒體DNA基因序列分析

對(duì)瓦螨線粒體DNA細(xì)胞色素氧化酶基因(CoI基因)序列比較分類的方法由D.Anderson提出，并成為目前世界上公認(rèn)的瓦螨分類手段。樣本采集后被置于70％乙醇中，-20℃保存。每個(gè)蟲體上提取的粗DNA預(yù)備物用COXF和COXRa引物擴(kuò)增出458bp的片段。使用雙脫氧末端終止循環(huán)測(cè)序工具進(jìn)行測(cè)序。在D.Anderson的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，分布于亞洲的東方蜜蜂上收集的雅氏瓦螨被檢測(cè)出有18個(gè)不同的基因型。(如圖1)

從32個(gè)不同國(guó)家的西方蜜蜂上采集的雌性雅氏瓦螨全部屬于朝鮮基因型或日本／泰國(guó)基因型，這兩種基因型也分別從朝鮮和日本／泰國(guó)的東方蜜蜂中發(fā)現(xiàn)。其中朝鮮基因型是最普遍的，分布于非洲、歐洲、中東、亞洲和美洲地區(qū)的西方蜜蜂上。其次是日本／泰國(guó)基因型，分布于日本、泰國(guó)與美洲的西方蜜蜂上。

可以得出結(jié)論，過去被稱為雅氏瓦螨的瓦螨實(shí)際上應(yīng)該是同屬的兩個(gè)不同的種類。其中一種中包含最初發(fā)現(xiàn)被稱為雅氏瓦螨的爪哇基因型，所以仍然沿用雅氏瓦螨的命名。而另外一種則被命名為狄斯瓦螨。但是要把斯里蘭卡基因型當(dāng)作狄斯瓦螨的同種還有待于更多的數(shù)據(jù)來證明，同時(shí)菲律賓的3個(gè)單獨(dú)的基因型(呂宋1、呂宋2和棉蘭老島基因型)也需要更多的研究來確定其分類學(xué)地位。近年來世界各國(guó)學(xué)者的研究還發(fā)現(xiàn)了狄斯瓦螨和雅氏瓦螨的新基因型，如Gudrun KOENIGER等人于2002年報(bào)道發(fā)現(xiàn)了雅氏瓦螨的Borneo2(馬來西亞婆羅洲)基因型，周婷博士等于2003年報(bào)道發(fā)現(xiàn)了狄斯瓦螨的China2(中國(guó)云南)基因型。相信隨著研究繼續(xù)深入廣泛的開展，新的基因型還會(huì)被不斷的發(fā)現(xiàn)。

3 形態(tài)學(xué)研究

瓦螨屬幾種瓦螨的形態(tài)十分相似。早先的形態(tài)學(xué)研究不能清楚的分辨雅氏瓦螨與狄斯瓦螨的表型區(qū)別。D.Anderson等用傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡和冷凍掃描電子顯微鏡分別研究了狄斯瓦螨和雅氏瓦螨背板的結(jié)構(gòu)和剛毛覆蓋情況，胸板、生殖板、肛板和腹股板(腹側(cè)板)的結(jié)構(gòu)和毛序，氣門板、后足板和口下板，還有腿上和觸須上剛毛的數(shù)量、排列和形態(tài)。

其研究的結(jié)果表明林氏瓦螨與恩氏瓦螨通過其身體特征就可以將其區(qū)分成單一的種類。但不能通過鑒別形態(tài)學(xué)特征(除了個(gè)體大小)來區(qū)分雅氏瓦螨與狄斯瓦螨，也不能區(qū)分出各基因型之間以及來自菲律賓的3個(gè)單獨(dú)的基因型的差別。因此，我們不能通過形態(tài)學(xué)鑒定的方法鑒別出我們要鑒別的種類。但是在雅氏瓦螨與狄斯瓦螨之間蟲體大小卻有顯著的不同，在蟲體大小評(píng)估中沒有重疊。

4 我國(guó)瓦螨的分類研究及分布情況

對(duì)于中國(guó)分布的瓦螨，D.Anderson僅測(cè)定了從廣州地區(qū)西方蜜蜂上隨機(jī)采到瓦螨標(biāo)本，并判斷其屬于狄斯瓦螨中的朝鮮基因型。而從廣州地區(qū)東方蜜蜂上來到的瓦螨則屬于狄斯瓦螨的中國(guó)基因型。

為了進(jìn)一步詳細(xì)了解我國(guó)東方蜜蜂與西方蜜蜂瓦螨種系的分類及分布狀況，在國(guó)家自然基金和美國(guó)農(nóng)業(yè)部的資助下，中國(guó)農(nóng)科院蜜蜂研究所與美國(guó)密執(zhí)安大學(xué)昆蟲系于2000—2002年調(diào)查研究了我國(guó)各主要省市的蜜蜂飼養(yǎng)場(chǎng)。并與澳大利亞聯(lián)邦科學(xué)院的Anderson博士合作對(duì)來自我國(guó)東北、西北、華東、華南、華中、西南等17個(gè)主要省區(qū)的西方蜜蜂狄斯瓦螨和采自云南、廣東的東方蜜蜂狄斯瓦螨共37個(gè)樣品進(jìn)行了生物學(xué)特性、系統(tǒng)分類學(xué)及自然分布的研究。內(nèi)容包括對(duì)我國(guó)主要蜜蜂飼養(yǎng)區(qū)大蜂螨寄生的流行病學(xué)調(diào)查，瓦螨在不同寄主間的繁殖特性研究，以及對(duì)我國(guó)蜜蜂瓦螨的分類學(xué)研究。其中對(duì)我國(guó)蜜蜂瓦螨的分類學(xué)研究中沿用了mtDNA COⅠ基因序列分析的方法，并取得了突破性的進(jìn)展。

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蜜蜂研究所周婷博士等在2004年APidolodie雜志上發(fā)表了對(duì)我國(guó)蜜蜂瓦螨分類研究的結(jié)論：危害我國(guó)各主要省區(qū)西方蜜蜂的瓦螨屬于狄斯瓦螨的朝鮮基因型；而寄生于東方蜜蜂各亞種和地理生態(tài)型的瓦螨應(yīng)屬于狄斯瓦螨的其他不同的基因型。采自廣東省廣州、中山、珠海等地中華蜜蜂的瓦螨為中國(guó)基因型(China1)，來自云南省西雙版納的中蜂瓦螨屬越南基因型，而在云南楚雄大姚)縣的中蜂瓦螨屬于中國(guó)Ⅱ基因型(China Ⅱ)。令人鼓舞的是其中中國(guó)Ⅱ基因型在世界上屬于首次發(fā)現(xiàn)，并不在D.Anderson博士發(fā)現(xiàn)的18個(gè)基因型之內(nèi)，其序列已經(jīng)在GenBank注冊(cè)(注冊(cè)號(hào)AY372063注冊(cè)人：Ting，z.，Anderson，D.L.，等)。這種基因型的瓦螨COI基因序列與中切片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(RFLP)，用XhoI SacI兩種限制酶消化樣品mtDNA COI基因片段。結(jié)論顯示：我國(guó)中蜂群的瓦螨屬于狄斯瓦螨的3個(gè)基因型(中國(guó)1、2基因型與越南基因型)，其序列均具有XhoI SacI兩個(gè)酶切位點(diǎn)；而我國(guó)意蜂群中瓦螨均為狄斯瓦螨的朝鮮基因型，其序列只存在xhoI位點(diǎn)而沒有SacI位點(diǎn)(日本基因型具備兩個(gè)酶切位點(diǎn))。該技術(shù)在一定范圍內(nèi)可以簡(jiǎn)便地區(qū)分意蜂螨和中蜂螨，而且進(jìn)一步證實(shí)了測(cè)序結(jié)果可靠性。

恩氏瓦螨于2002年4月在中國(guó)云南西雙版納由黃雙修研究員(中國(guó)農(nóng)科院蜜蜂研究所)發(fā)現(xiàn)。根據(jù)野外調(diào)查，其主要寄生于中蜂雄蜂房中，被檢查群的雄蜂房自然寄生率為2.24％，寄生數(shù)量要低于狄斯瓦螨，但其潛在的危害能力不低于狄斯瓦螨。

還有，在我國(guó)意蜂群和中蜂群寄生的瓦螨全部都是狄斯瓦螨的不同基因型，末發(fā)現(xiàn)雅氏瓦螨。而我國(guó)從前的相關(guān)文獻(xiàn)和書籍都把大蜂螨稱作雅氏瓦螨，是不妥當(dāng)?shù)摹?duì)于我國(guó)是否存在雅氏瓦螨，也是我們課題組密切關(guān)注的問題之一。

5 討論

關(guān)于瓦螨分類學(xué)方面的研究具有重大的科學(xué)和實(shí)踐意義。瓦螨是對(duì)全球養(yǎng)蜂業(yè)具有重大威脅的重要害蟲。要實(shí)現(xiàn)對(duì)它的有效防治，首先要迅速準(zhǔn)確地判斷出寄生瓦螨的種類。由于種類的不同，其生物學(xué)特性也會(huì)有所不同，那么對(duì)其的防治措施也會(huì)更加具有針對(duì)性，才能達(dá)到良好的防治效果。

另外，對(duì)瓦螨分類學(xué)方面的研究可進(jìn)一步揭示出瓦瞞的生物起源，進(jìn)化過程與方向，傳播途徑與變異程度等。這使得我們更加了解這種害蟲的生物特性與傳播路徑，使我們有可能對(duì)瓦螨在世界的傳播做出預(yù)報(bào)并采取相應(yīng)的措施。為研究其它生物的起源、進(jìn)化與發(fā)展提供了許多有用的數(shù)據(jù)和理論。

但是，對(duì)于雅氏瓦螨與狄斯瓦螨的分類學(xué)研究還存在著一些值得探討的問題。比如：菲律賓群島上采集的3個(gè)基因型的瓦螨其分類學(xué)地位仍有待確定；而斯里蘭卡基因型的瓦螨與相似的狄斯瓦螨各基因型之間的遺傳學(xué)差距比較大，所以仍不能確定其是否是同一種；狄斯瓦螨中只有兩個(gè)基因型可以危害西方蜜蜂，其原因尚不清楚。

根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查，在我國(guó)北方地區(qū)沒有發(fā)現(xiàn)過中蜂瓦螨。但是有關(guān)文獻(xiàn)記載，早先在俄羅斯西伯利亞地區(qū)發(fā)現(xiàn)過東方蜜蜂的瓦螨。這可能與螨的寄生率以及各地區(qū)蜜蜂的飼養(yǎng)情況有關(guān)。其確切原因還有待于進(jìn)一步的調(diào)查。

線粒體DNA由于特殊的遺傳方式，且其一級(jí)結(jié)構(gòu)在種間和種內(nèi)都存在著顯著的歧化現(xiàn)象，具有快速進(jìn)化的特點(diǎn)，是分子分類學(xué)的一個(gè)重要研究方向。其中mtDNA－16SrRNA基因序列在近緣種鑒別和分子系統(tǒng)學(xué)研究中已多有應(yīng)用。但還未見有報(bào)道用于蜜蜂寄生瓦螨的種類鑒定。其它常用于分類基因比較方法也未見用于對(duì)瓦螨近緣種類的鑒定。

引自《中國(guó)蜂業(yè)》2006（2）