表5糖量計(jì)溫差改正表

蜂蜜理化指標(biāo)檢驗(yàn)方法 （補(bǔ)充件） 1 試樣制備

　　有結(jié)晶析出的樣品，可置于不超過60C的水浴中，持結(jié)晶全部融化后攪勻，冷至定溫，以備檢驗(yàn)用，在融化時(shí)必 須注意防止水侵入、檢驗(yàn)淀粉酶值用的試樣不經(jīng)融化直接混勻稱取。

2 水分測定

2.1儀器 阿貝折光儀；超級恒溫器。

2.2操作程序。 將阿貝折光儀與超級恒溫器聯(lián)接好，并將超級恒溫器的溫度調(diào)至所需溫度。

2.2.1折光儀的校正在測定樣品折光指數(shù)前，先用新制蒸餾水按表1校正折光儀。 表1蒸餾水折光指數(shù)表 調(diào)節(jié)通過折光儀的水流，使溫度恰為40C，分開折光儀的兩面棱鏡，用脫脂棉蘸蒸餾水擦凈 （必要時(shí)可蘸二甲苯或乙醚試凈）然后用干凈的脫脂棉（或攝鏡紙）擦干，待棱鏡完全干燥后用玻璃棒蘸取蒸 餾水l～2滴，滴于下面的棱鏡上，迅速閉合棱鏡對準(zhǔn)光源，由目鏡觀察， 旋轉(zhuǎn)手輪，使標(biāo)尺上的折光指數(shù)恰為 40C時(shí)水的折光指數(shù)，觀察接物鏡內(nèi)明暗分界線是否在十字線中間，若有偏差則用附件方孔調(diào)節(jié)扳手轉(zhuǎn)動(dòng)示值調(diào) 節(jié)螺釘，使明暗分界線調(diào)整至中央。在以后測定樣品過程中螺釘不允許再動(dòng)。

2.2.1樣品測定開始測定之前必須將進(jìn)光棱鏡及折射棱鏡擦洗干凈。以免留有其它物質(zhì)影響測定精度、用玻璃棒 蘸取均勻的試樣l～2滴。滴于下面的棱鏡上，迅速閉合棱鏡。靜置片刻。以待試樣達(dá)到40℃，對準(zhǔn)光源，由目鏡 觀察，轉(zhuǎn)動(dòng)補(bǔ)償器螺旋，使明暗兩部分界線明晰；轉(zhuǎn)動(dòng)標(biāo)尺指針螺旋，使其明暗兩部分界線恰通過接物鏡上十字 線的交點(diǎn)，同時(shí)旋轉(zhuǎn)阿米西棱鏡手輪，使視場中除黑白二色外無其它顏色。讀出標(biāo)尺上的折光指數(shù)。同時(shí)核對溫 度應(yīng)格為40℃。 按下式計(jì)算水分的百分率 水分（％）=100－[78十390.7（n－1.4768）] 式中n＿試樣蜜在40℃時(shí)測得的實(shí)際折光指數(shù)。 平行試驗(yàn)結(jié)果的允許誤差為±0.2％。

3.還原糖的測定一斐林氏法

3.1試劑

3.1.1斐林氏A液（硫酸銅溶液）稱硫酸銅（CllSO4．5H2O）34.639g，溶解于少量蒸餾水中，然后稀釋至 500 ml。

3.1.2斐林氏 B液（堿性酒石酸鉀納溶液）稱取 173 g酒石酸鉀鈉及 50g氫氧化鈉溶解于少量蒸餾水中，然后 稀釋至500。l。

3.1.3 10％氫氧化鈉溶液。

3.1.4 0.5％葡萄糖溶 液稱取0.5g無水葡萄糖，加水至100ml。

3.1.5 o.1％次甲基藍(lán)指示劑稱取0.1g次甲基藍(lán)粉末溶解于110rnl蒸餾水中貯于有色瓶中備用。

3.2斐林氏溶液效價(jià)標(biāo)定 精確吸取斐林氏A及B液各5ml于125ml三角燒瓶中，加0.5％葡萄糖2ml，放在電爐上或酒精燈上煮沸若藍(lán)色不變 繼續(xù)用葡萄糖液滴至淺藍(lán)色，加o.1％次甲基藍(lán)指示劑2滴，再繼續(xù)用葡萄糖液滴定至藍(lán)色消失為止。 10 ml斐林氏溶液相當(dāng)還原糖（g）=0.0005xA 式中 A?滴定斐林氏液 10 ml所用去標(biāo)準(zhǔn)滴液量。

3.3檢液的制備 稱取蜜樣 1g，溶少干量水中，用 10％氫氧化鈉溶液調(diào)至弱堿性，用蒸餾水定客 100 ml待測。

3.4 操作步驟

3.4.1精確吸取斐林氏 A及 B波各 5ml，放入 125 ml三角燒瓶中搖勻置于電爐上成酒精燈上煮沸。

3.4.2用滴定管加入 2 ml制備好的檢液，再煮沸，若不變色，再繼續(xù)用滴定管趁沸騰時(shí)將檢液一滴一滴加入， 直到藍(lán)色快消失時(shí)，加入0.1％次甲基藍(lán)指示劑2滴，繼續(xù)用檢液滴定至藍(lán)色消失為止記其用量。 3.5計(jì)算 10斐林氏溶液相當(dāng)于還原糖克數(shù) 還原糖=????????×100 W×消耗檢液用量 ------------- 100 式中W?皇匝?亓俊?/P>

4 蔗糖的測定?斐林氏法

4.1試劑 4.1. 20％鹽酸溶液。

4.1.2 20％氫氧化鈉溶液。

4.1.31％甲基橙指示劑 稱取 1g甲基橙，溶解于 100 rnl蒸餾水中。

4.1.4斐林氏A液（同前）。

4.1.5斐林氏B液（同前）。

4.1.6 0.1％次由基藍(lán)指示劑。

4.2操作步驟

4 .2.1.吸取前述制備好的檢液50 rnl于 100ml容量瓶中，放在水浴上加熱至 70℃

4 .2. 2加入20％鹽酸 10 0ml，繼續(xù)加溫保持 70℃10 min。

4.2.3取出容量瓶冷卻到室溫（20℃）加甲基橙指示利 1滴，用 20％氫氧化鈉中和，然后加蒸餾水稀釋至刻度 。搖勻即為測定蔗糖含量的檢液，倒入滴定管內(nèi)備用。

4.2.4精確吸取斐林氏 A及 B液各 5ml 于 125 ml三角燒瓶內(nèi)，放在電爐或酒精燈上加熱煮沸。

4.2.5趁沸騰用液定管加入2ml檢液，待沸騰若藍(lán)色不變，再滴加檢液，將接近藍(lán)色時(shí)加入2滴次甲基藍(lán)指示劑 ，繼續(xù)用檢液趁沸騰時(shí)滴至藍(lán)色消失為止，記其用量。

4.3計(jì)算 A 轉(zhuǎn)化糖（％）=???/FONT>100 W×50 B -----×------ 100 100 WX：＝＝X；， 式中W一試樣重量（g）； B?滴定時(shí)消耗檢液的毫升數(shù)； A??/FONT>10ml斐林氏波相當(dāng)還原糖克數(shù)； 蔗糖（％）=轉(zhuǎn)化糖（％）一還原糖（％）×0.95； 0.95?0. 95 g蔗糖可以轉(zhuǎn)化 1g的單糖。

5 淀粉酶施值測定

5.l試劑

5.1.1 0.1N氫氧化鈉溶解2g氫氧化鈉于1L蒸餾水中。

5.1.2 0.1N氯化鈉溶液溶解0.59g氯化鈉于100ml蒸餾水中。

5.1.3 0. 2 N乙酸溶液取 0. 6 ml 20％乙酸用蒸餾水稀釋至 100 ml。

5.1.4 l％淀粉溶液 稱取100g（以干態(tài)計(jì)）可溶性淀粉 置于燒杯中，加入少量蒸餾水使成薄漿，加入 60ml沸 騰蒸餾水,在攪拌下煮沸 1～2 min,使淀粉溶液透明、稍冷用蒸餾水清洗，使淀粉溶液全部傾入 100 ml容量瓶 中，冷卻后圍蒸餾水稀釋至標(biāo)線，搖勻備用。 注上述淀粉溶液應(yīng)用于臨用時(shí)新鮮配制，其 PH約為 4. 8～5. 5取約 0. 2 ml用蒸餾水稀釋至 30 ml，加 1滴 0.1 N碘溶液試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)是純藍(lán)色。

5.1.5 0.1N碘溶液溶解12.69g 的再升華碘和13g碘化鉀于蒸餾水中，稀釋至1L。

5.1.6酚酞指示劑l％乙醇溶液。

5.2操作程序 稱取試樣 10g（精確至 0. 01g）溶解于50～70 ml蒸餾水中加入酚酞指示劑 2一3滴，用0. 05 N氫氧化鈉溶 液中和、將此溶液傾于 100ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至標(biāo)線。取大小相同的試管 12只，做好序號(hào)標(biāo)記，按 表 2分別加入蜂蜜試樣溶液、蒸餾水、0.1 N氯化鈉溶、0.2N乙酸溶液和l％淀粉溶液，搖勻后立即將所有試管 同時(shí)浸人45～50℃水浴中，使試管液面浸入水浴水面下約 2. 5 cm，在此溫度下放置 1h取出后，立即在冰水 中冷卻，隨即在每一試管中加1滴0.lN碘溶液，搖勻后立即視察。此時(shí)各試管中的顏色順次由黃色經(jīng)紅色、紫 紅色。紫色至藍(lán)色，根據(jù)紫紅包試管號(hào)數(shù)，由表6查出淀粉酶值必要時(shí)可多加1滴碘溶液后觀察。

注本試驗(yàn)所用蒸餾水約需預(yù)先經(jīng)煮沸而冷卻的

6 酸度測定

6.1試劑

6.1.1 0.1N氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 溶解4g氫氧化鈉于1L經(jīng)煮沸而冷卻的蒸餾水中用鄰苯二甲酸氫甲照下定其規(guī)定 濃度。 稱取預(yù)先在125℃時(shí)干燥的分析純鄰苯二日酸氫鉀0.8一0.9g（精確至0.0002g），置于250 ml錐形瓶中，用50 ml蒸餾水溶解，加入 2～3滴酚酞指示劑，用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至 粉紅色按下式計(jì)算氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的 標(biāo)定濃度（N） G N=-------------- V×0.2042 式中G?鄰苯二甲酸氫鉀重量（g） V一滴定所耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的量（ml） 0.2042?渙詒蕉?姿崆餳氐暮量說繃俊?/P>

6.1.2酚酞指示劑 1％乙醇溶液

6.1.3操作程序 稱取試樣10g（精確至0.001g），溶于75ml經(jīng)煮沸而冷卻的蒸餾水中，加入酚酞指示劑，用氫 氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淡粉紅色為止（10s不褪色）。 按下式計(jì)算酸度 V× N 酸度=-----------------×100 W 式中V?/FONT> 滴定所耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的量（ml）； N?氫氧化鈉溶液的標(biāo)定濃度； W?試樣重量（g）； 平行試驗(yàn)結(jié)果允許誤差為0.1

7費(fèi)氏反應(yīng)

7.1試劑

7.1.1.l％間苯二酚鹽酸溶液 溶解 .0.1g間苯二酚 10 ml濃鹽酸（比重 1. 19）中，溶液應(yīng)為無色（該液臨用 時(shí)新鮮配制）

7.1.2乙醚應(yīng)不含過氧化物、水分和醇類。滴入間苯二酚鹽酸溶液后應(yīng)為無色，揮發(fā)后應(yīng)無殘留物、必要時(shí)用氯 化鈣干燥，蒸餾、加入金屬鈉后備用。 注：處理乙酸，一定不能使蒸餾瓶蒸干。加入金屬鈉指的是無水乙醚否則會(huì)有爆炸危險(xiǎn)。

7.2操作程序

7 .2.I研磨法稱取 5. 0g試樣置個(gè)底部外徑約 7 crn的研體中。加入3 ml乙醚，用缽體研磨至乙酸完全揮發(fā)（ 約1.5ml）然后每次加入3ml乙醚，每次研磨1min約60次），使剩余乙醇的1ml，傾入直徑約7cm的內(nèi)面光潔的瓷 蒸發(fā)皿中，如此共研磨3次，將所有收集在蒸發(fā)皿中的乙醚萃取液在室溫下任其揮發(fā)，如有水滴殘留，可加微 熱（不超過40℃）后。再使揮發(fā)冷卻。滴加3一4滴間苯二酸鹽酸溶液，立即旋蕩，使殘留品全面潤濕，靜置lh 后觀察，如有櫻桃紅色，即為正反應(yīng)。

7.2.2試管法取20.0g試樣置于小燒杯中加入20ml蒸餾水，攪拌使溶解，取出10m1裝了試管中，加入5 ml乙醚， 在 lmin內(nèi)倒轉(zhuǎn)混和約 25次，靜置使上層乙酸澄清，小心將乙醚傾入另一試管中，應(yīng)得約 2 ml乙酸萃取液、滴 入 3一4滴間苯二酚鹽酸溶液，振蕩并觀察顏色，在 1min內(nèi)出現(xiàn)櫻桃紅色即為正反應(yīng)。 注如有爭議時(shí)，用研磨法檢驗(yàn)。